一、概述

恒久毒性试验（重复给药毒性试验）是药物非临床清静性评价的焦点内容，，，它与急性毒性、生殖毒性以及致癌性等毒理学研究有着亲近的联系，，，是药物从药学研究进入临床试验的主要环节！。

在药物开发的历程中，，，恒久毒性试验的目的是通过重复给药的动物试验表征受试物的毒性作用，，，预测其可能对人体爆发的不良反映，，，降低临床试验受试者和药品上市后使用人群的用药风险！。详细包括以下五个方面：①预测受试物可能引起的临床不良反映，，，包括不良反映的性子、程度、剂量－反映关系和时间－反映关系、可逆性等；
；；②判断受试物重复给药的毒性靶器官或靶组织；
；；③推测临床试验的起始剂量和重复用药的清静剂量规模；
；；④提醒临床试验中需重点监测的指标；
；；⑤还可以为临床试验中的解毒或解救步伐提供参考！。必需强调的是，，，恒久毒性试验的最终目的是为临床试验和临床用药服务！。

药物开发的配景和基础研究资料各不相同，，，在举行恒久毒性试验之前应对药物的已有资料举行综合剖析，，，判断是否可以通过已有资推测达恒久毒性试验的目的，，，为临床试验和临床用药提供支持！。原则上，，，若是已有资料尚不可抵达恒久毒性试验的目的，，，从包管临床用药清静的角度就应该举行恒久毒性试验；
；；反之，，，则可以不必举行恒久毒性试验！。

药物的开发是一个连续的、渐进的系统工程，，，恒久毒性试验是药物开发的一个有机组成部分！。恒久毒性试验不可与药效学、药代动力学和其他毒理学研究割裂，，，试验设计应充分思量其他药理毒理研究的试验设计和研究效果！。恒久毒性试验的效果应该力争与其他药理毒理试验效果互为印证、说明和增补！。

恒久毒性试验的试验设计应该在对受试物的认知基础上，，，遵照 “详细问题详细剖析”的原则举行！。试验设计应凭证化合物的结构特点和理化性子、同类化合物在海内或外洋的临床使用情形、临床顺应证和用药人群、临床用药方案、相关的药效学、药代动力学和毒理学研究信息等综合思量！。

二、基本内容

（一）受试物

恒久毒性试验应接纳制备工艺稳固、切合临床试验用质量标准划定的样品！。受试物应注明名称、泉源、批号、含量（或规格）、生涯条件及配制要领等，，，并附有研制单位的自检报告！。所用辅料、溶媒等应注明批号、规格和生产厂家，，，并切合试验要求！。

    在药物开发的历程中，，，若受试物的制备工艺爆发可能影响其清静性的转变，，，应举行响应的清静性研究！。

（二）实验动物

1. 实验动物种属或品系的选择

一般化学药物的恒久毒性试验接纳两种实验动物，，，一种为啮齿类，，，另一种为非啮齿类！。理想的动物应具有以下特点：①对受试物的生物转化与人体相近；
；；②对受试物敏感；
；；③已有大宗历史比照数据！；
；；谙衷诤Ｄ诘南肿，，，在大大都恒久毒性试验最先时，，，尚无法判断差别种系实验动物和人体对受试物的生物转化的一致性，，，通常以大鼠和Beagle 犬或猴作为恒久毒性试验的实验动物！。某些特殊结构的受试物应选用特殊种属或品系的动物举行恒久毒性试验，，，须要时，，，也可选用疾病模子动物举行试验！。勉励在恒久毒性试验前接纳体外试验系统对实验动物的种属或品系举行筛选！。

2. 实验动物的质量控制

恒久毒性试验一般选择正、康健和未孕的动物，，，动物体重差别应在平均体重的20％之内！。动物应切合国家有关划定的品级要求，，，泉源、品系、遗传配景清晰，，，并具有实验动物质量及格证！。应凭证研究限期的是非和受试物临床应用的患者群确定动物的年岁！。动物年岁应只管一致，，，一般大鼠为6～9 周龄，，，Beagle 犬为6～12 月龄！。

3. 实验动物的性别和数目

一般情形下，，，恒久毒性试验中每个试验组应使用相等数目的雌、雄动物！。每组动物的数目应能够知足试验效果的剖析和评价的需要！。一般大鼠为雌、雄各10～30 只，，，Beagle 犬或猴为雌、雄各3～6 只！。

（三）给药方案

1. 给药剂量

恒久毒性试验一般至少设高、中、低三个剂量给药组和一个溶媒（或辅料）比照组，，，须要时还需设立空缺比照组或阳性比照组！。由于理论上群体中毒性反映的爆发率随袒露量的增添而增添，，，以是高剂量原则上应使动物爆发显着的毒性反映，，，甚至泛起个体动物殒命！。低剂量原则上应高于动物药效学试验的等效剂量，，，并不使动物泛起毒性反映！。为考察毒性反映剂量-反映关系，，，应在高剂量和低剂量之间设立中剂量！。

2. 给药途径

原则上应与临床用药途径一致，，，否则应说明原因！。

3. 给药频率

原则上恒久毒性试验中动物应天天给药，，，给药限期长（3 个月或以上）的药物每周至少应给药6 天！。特殊类型的受试物由于其毒性特点和临床给药方案等原因，，，应凭证详细药物的特点设计给药频率！。

4. 给药限期

恒久毒性试验的给药限期通常与制订的临床疗程、临床顺应证和用药人群有关！。

临床单次用药的药物，，，给药限期为2 周的恒久毒性试验通？？？芍С制渚傩辛俅彩匝楹蜕！。

临床疗程不凌驾2 周的药物，，，给药限期为1 个月的恒久毒性试验通？？？芍С制渚傩辛俅彩匝楹蜕！。

临床疗程凌驾2 周的药物，，，可以在临床前一次性举行支持其进入III 期临床试验（及生产）的恒久毒性试验；
；；也可以通过差别给药限期的恒久毒性试验来划分支持其进入I 期、II 期或III 期临床试验（及生产）！。一般1 个月的恒久毒性试验可支持用药时间不凌驾2 周的I期临床试验！。

通过给药限期较短的毒性研究获得的信息，，，可以为给药限期较长的毒性研究设计提供应药剂量、给药频率等方面的参考；
；；同时，，，临床试验中获得的信息有助于给药限期较长的动物毒性研究方案的设计，，，降低药物开发的风险！。

    以差别给药限期的恒久毒性试验来划分支持药物进入I 期、II 期或III 期临床试验（及生产）时，，，差别给药限期的恒久毒性试验的内容应完整、规范，，，对效果的剖析评价应科学、合理！。

（四）检测指标和检测时间

除必需的检测指标外，，，恒久毒性试验应凭证受试物的特点，，，有针对性地增添响应的检测指标！。

试验前，，，啮齿类动物至少应举行5 天的顺应性视察，，，非啮齿类动物至少应驯养视察1～2 周，，，应对实验动物举行外观体征、行为活动、摄食量和体重检查，，，非啮齿类动物还至少应举行2 次体温、心电图、血液学和血液生化学指标等的检测！。别的，，，实验动物相关指标的历史配景数据在恒久毒性试验中也具有主要的参考意义！。

试验时代，，，应对动物举行外观体征、行为活动、摄食量、体重、粪便性状、给药局部反映、血液学指标、血液生化学指标等的视察！。非啮齿类动物还应举行体温、心电图、眼科检查和尿液剖析！。应凭证试验周期的是非和受试物的特点确定检测时间和检测次数！。原则上应尽早发明毒性反映，，，并反映出视察指标或参数的转变与给药限期的关系！。

给药竣事后，，，应对动物（除恢复期视察动物）举行周全的概略剖解，，，主要脏器应称重并盘算脏器系数！。组织病理学检核对判断动物的毒性靶器官或靶组织具有主要的意义，，，病理学检查报告应经检查者署名和病理检查单位盖章，，，如发明有异常转变，，，应附有响应的组织病理学照片！。非啮齿类动物比照组和各给药组主要脏器组织均应举行组织病理学检查；
；；啮齿类动物比照组和高剂量给药组动物，，，以及尸检异常者应详细检查，，，如某一组织爆发病理改变，，，其他剂量组动物该组织也应举行组织病理学检查！。

    恒久毒性试验应在给药竣事后对部分动物举行恢复期视察，，，以相识毒性反映的可逆程度和可能泛起的延迟性毒性反映！。应凭证受试物的代谢动力学特点、靶器官或靶组织的毒性反映和恢复情形确定恢复期的是非！。

（五）毒物代谢动力学

毒物代谢动力学（简称毒代动力学）系指连系恒久毒性试验举行的考察药物系统袒露的代谢动力学研究！。毒代动力学可以形貌实验动物的系统袒露与袒露剂量、袒露时间和毒理学效果之间的关系！。本指导原则中毒代动力学研究的主要目的在于诠释恒久毒性试验的效果！。

毒代动力学试验应选择合适的时间点采样测定，，，从而获得药时曲线下面积（AUC ）、峰浓度（Cmax）、达峰时间（Tmax）等参数！。某些药物应连系药物血浆卵白连系率来评价系统袒露量！。毒代动力学数据可以来自恒久毒性试验的所有动物，，，也可以来自部分动物！。建议此部分动物应包括低、中、高剂量组的动物，，，以便估算高剂量药物在动物体内的动力学历程是否属非线性动力学历程！。

三、效果剖析及评价

    恒久毒性试验的最终目的在于预测人体可能泛起的毒性反映！。只有通过研究效果的科学剖析和评价才华够清晰形貌动物的毒性反映，，，并推断其与人体的相关性！。恒久毒性试验效果的剖析和评价是恒久毒性试验的须要组成部分，，，必需对研究效果举行科学和周全的剖析和评价！。

（一）研究效果的剖析

剖析恒久毒性试验效果的目的是判断动物是否爆发毒性反映，，，形貌毒性反映的性子和程度（包括毒性起始时间、程度、持续时间以及可逆性等）和靶器官，，，确定清静规模，，，并探讨可能的毒性作用机制！。

1. 准确明确试验数据的意义

在对恒久毒性试验效果举行剖析时，，，应准确明确均值数据和单个数据的意义！。啮齿类动物恒久毒性试验中组均值的意义通常大于单个动物数据的意义，，，实验室历史配景数据和文献数据可以为效果的剖析提供参考！。非啮齿类动物数目少、个体差别大，，，因此单个动物的试验数据往往具有主要的毒理学意义！。别的，，，非啮齿类动物试验效果必需与给药前数据、比照组数据和实验室历史配景数据举行多重较量，，，文献数据参考价值有限！。

在剖析恒久毒性试验效果时应综合思量数据的统计学意义和生物学意义！。准确使用统计学假设磨练有助于确定试验效果的生物学意义，，，但具有统计学意义并纷歧定代表具有生物学意义！。在判断生物学意义时应思量到参数转变的剂量-反映关系、其他相关参数的改变，，，以及与历史配景数据的较量！。

别的，，，在对恒久毒性试验效果举行剖析时，，，应对异常数据举行合理的诠释！。

2. 准确判断毒性反映

    给药组和比照组之间检测参数的差别可能来自于与受试物有关的毒性反映、动物对药物的顺应性改变或正常的心理波动！。在剖析试验效果时，，，应关注参数转变的剂量－反映关系、组内动物的参数转变幅度和性别差别，，，同时综合思量多项毒理学指标的检测效果，，，剖析其中的关联和作用机制，，，以准确判断药物的毒性反映！。单个参数的转变往往并缺乏以判断化合物是否引起毒性反映，，，可能需要进一步举行相关的研究！。别的毒代动力学研究可以为毒性反映和毒性靶器官或靶组织的判断提供主要的参考依据！。

（二）动物毒性反映关于临床试验的意义

将恒久毒性试验效果外推至人体时，，，不可阻止地会涉及到受试物在动物和人体内毒性反映之间的差别！。首先，，，差别物种、同物种差别种属或个体之间关于某一受试物的毒性反映可能保存差别；
；；其次，，，由于在恒久毒性试验中通常接纳较高的给药剂量，，，受试物可能在动物体内呈非线性动力学代谢历程，，，从而导致与人体无关的毒性反映；
；；另外，，，恒久毒性试验难以预测一些在人体中爆发率较低的毒性反映或仅在小部分人群中泛起的特异质反映；
；；同时有些毒性反映现在在动物中难以检测，，，如头痛、头昏、头晕、腹胀、皮肤搔痒、视物：取！。鉴于以上原因，，，动物恒久毒性试验的效果一般不会完全再现于人体临床试验！。但若是没有试验或文献依据证实受试物对动物的毒性反映与人体无关，，，在举行药物评价时必需首先假设人最为敏感，，，恒久毒性试验中动物的毒性反映将会在临床试验中再现！。

    举行深入的作用机制研究将有助于判断动物和人体毒性反映的相关性！。

（三）综合评价

恒久毒性试验是药物非临床清静性研究的有机组成部分，，，是药物非临床毒理学研究中综合性最强、获得信息最多和对临床指导意义最大的一项毒理学研究！。对其效果举行评价时，，，应连系受试物的药学特点，，，药效学、药代动力学和其他毒理学研究的效果，，，以及已取得的临床研究的效果，，，举行综合评价！。关于恒久毒性试验效果的评价最终应落实到受试物的临床不良反映、临床毒性靶器官或靶组织、清静规模、临床需重点检测的指标，，，以及须要的临床监护或解救步伐！。